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在冠狀病毒2019-nCoV的分子生物學(xué)研究中,電泳技術(shù)是一個(gè)重要方法,主要用于核酸、蛋白質(zhì)的分離與鑒定,使用的實(shí)驗儀器主要是電泳儀。本文,樂(lè )楓純水為大家總結了實(shí)驗中常出現的問(wèn)題和解決方法。
一、什么是核酸電泳?
核酸電泳是基因操作的核心技術(shù)之一,用于分離、鑒定DNA、RNA 分子混合物和純化DNA小片段。
二、核酸電泳異常條帶問(wèn)題
核酸電泳實(shí)驗中,常常會(huì )遇到條帶模糊、拖尾、扭曲等現象,究其原因,除了操作不當,電泳條件未優(yōu)化,電泳緩沖液也是重要的影響因素之一。電泳緩沖液的組成及其離子強度影響DNA的電泳遷移率。
表1 核酸電泳條帶異常的原因匯總及建議的解決方法
常見(jiàn)問(wèn)題 | 原因 | 解決方法 |
條帶模糊 | 核酸降解 | 使用不含核酸酶的超純水配置緩沖液 |
電泳緩沖液陳舊 | 建議經(jīng)常更換緩沖液 | |
有蛋白污染 | 使用低有機物的超純水配置緩沖液 | |
核酸變性 | 使用超純水或者緩沖液稀釋樣品 | |
條帶黯淡 | 核酸濃度過(guò)低 | 增加上樣量 |
核酸降解 | 使用不含核酸酶的超純水配置緩沖液 | |
條帶被示蹤染料掩蓋 | 避免使用與目的片段遷移率相同的示蹤染料 | |
拖帶或涂抹帶 | PCR體系或PCR程序不合適 | 優(yōu)化PCR體系和PCR程序 |
條帶扭曲 | 配膠緩沖液和電泳緩沖液不同 | 配膠和電泳中使用同一批緩沖液 |
電泳時(shí)電壓過(guò)高 | 控制電泳時(shí)電壓不超過(guò)6V/CM |
三、核酸電泳用純水要求
為了防止水中雜質(zhì)(如:核酸酶、蛋白質(zhì)、離子等)對電泳結果的影響,核酸電泳實(shí)驗配置緩沖溶液或稀釋樣品需要使用超純水:
● 電阻率 18.2 MΩ·cm
●TOC < 10 ppb
● 無(wú)核酸酶
● 細菌總數< 1 CFU/mL
● 熱原< 0.005 EU/mL
● 0.22 μm 或更低的顆粒過(guò)濾
四、核酸電泳用純水機推薦
樂(lè )楓生物新一代Genie系列智能純水系統是一款專(zhuān)注于解決用戶(hù)需求的實(shí)驗室純水機。Genie系列智能純水系統采用樂(lè )楓理念——無(wú)線(xiàn)連接、“1+N”模式,具有系統智能化、設計人性化、水質(zhì)標準化三大特色。
廣州某疾控中心安裝的Genie G以自來(lái)水為進(jìn)水產(chǎn)EDI純水和超純水
荷蘭安裝的Genie U以自來(lái)水為進(jìn)水產(chǎn)RO純水和超純水
穩定可靠的水質(zhì)
• 集合優(yōu)化的流路設計、技術(shù)先進(jìn)的 EDI 模塊和樂(lè )楓LeFil 和OrganeFil 配方填料的超純化柱,純水和超純水水質(zhì)達到或超過(guò)相關(guān)實(shí)驗室用水標準;
• 配備RephiBio 終端過(guò)濾器,可有效去除水中的熱原(內毒素)、核酸酶、細菌等雜質(zhì),滿(mǎn)足核酸電泳實(shí)驗用水要求。
用戶(hù)體驗佳
• 觸控屏采用高靈敏度防水屏幕,可帶乳膠手套操作
• 采用智能IT技術(shù),取水手柄與主機可無(wú)線(xiàn)連接,取水點(diǎn)與主機的距離不受電線(xiàn)長(cháng)度的限制,讓您享受“無(wú)線(xiàn) · 自由”的用水體驗;
• 遠程取水終端的手柄設計符合人體工學(xué),升降只手操作;亦可實(shí)時(shí)查看水質(zhì)信息,完成手動(dòng)取水或定量取水等操作
隨著(zhù)國內疫情形勢逐步好轉,全國各地高校陸續公布了學(xué)生返校復課時(shí)間,宅在家中那么久的你,是不是突然變得不安起來(lái)?不要慌,超實(shí)用的實(shí)驗室純水應用小技巧“助你成功”!
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關(guān)于樂(lè )楓生物
樂(lè )楓生物(Rephile Bioscience,Ltd.) 是一家專(zhuān)業(yè)從事水純化和實(shí)驗室分離純化產(chǎn)品研發(fā)、設計和制造的企業(yè),為高科技生物技術(shù)和生命科學(xué)領(lǐng)域的用戶(hù)服務(wù)。樂(lè )楓公司著(zhù)眼于發(fā)展,在中國、美國、法國、印度、南非等近20個(gè)國家建立了銷(xiāo)售機構,同時(shí)也為大型公司提供OEM和ODM,產(chǎn)品銷(xiāo)往包括歐美的近100個(gè)國家。成立十余年,樂(lè )楓持續投入研發(fā),創(chuàng )立出了自己的產(chǎn)品品牌RephiLe(瑞楓),推出了多個(gè)新概念產(chǎn)品- 無(wú)線(xiàn)連接的Genie系列純水系統和智能型大流量純水工作站Super-Genie等。目前樂(lè )楓純化柱填料配方齊全,也提供多款密理博純水系統的兼容耗材。
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